一种制备小菜蛾雄性不育品系的方法及其核酸
一、项目简介
本发明属于生物技术领域。本发明人经过广泛研究和反复试验,通过对基因突变位点的选择以及转基因质粒的构建,敲除小菜蛾Sericin 2-encoding(PxSer2)基因,构建了一个Ser2基因突变小菜蛾品系,发现Ser2基因突变后,雌雄突变体的正常交配行为均不受影响,雌性突变体作为亲本的小菜蛾卵孵化率正常,然而雄性突变体作为亲本的小菜蛾卵不能孵化,可见Ser2基因突变体的小菜蛾雄性高度不育,且雌虫突变体可遗传到下一代雄虫,达到稳定遗传的有效突变后代,从而完成了本发明。
二、专利摘要
本发明公开了制备小菜蛾雄性不育品系的方法及其核酸。本方法包括以下步骤:1)合成sgRNA,所述的sgRNA的模板从5’端到3’端包括以下可操作性元件:T7启动子,Ser2基因靶点和gRNA;2)合成Cas9mRNA,所述的Cas9mRNA的模板从5’端到3’端包括:启动子,Cas9编码序列和SV40终止子;3)将步骤1)所得的sgRNA和步骤2)所述的Cas9mRNA混合后显微注射小菜蛾新鲜卵中,孵化,即得雄性不育的小菜蛾。本发明利用CRISPR/Cas9技术敲除小菜蛾Ser2基因,提供了小菜蛾雄性不育遗传品系,解决了传统的通过辐射和四环素诱导不育昆虫的方法不能稳定有效遗传给后代的问题。通过对雌性突变体小菜蛾的释放,可用于野外防治小菜蛾虫害,为害虫防治提供新思路。
三、专利状态
本技术已递交中国专利申请,申请号:201810111395.0,已获授权;持有人项目编号:SIPPE18-04。
四、持有单位
中国科学院分子植物科学卓越创新中心。
五、合作方式
转让、许可或合作研发。
六、联系方式
张雯,wzhang@cemps.ac.cn,021-54924138。