一、项目简介

本发明属于生物技术领域。涉及一种利用家蚕生产蜘蛛丝蛋白的方法。本发明基于TALEN的基因敲入，实现蜘蛛丝基因MaSp1在家蚕丝素重链基因座对FibH基因的替换，获得一种家蚕非转基因形式的丝素重链替换系统，可将家蚕的丝腺组织作为生物反应器用来大量生产蜘蛛丝蛋白，从而大量表达外源蛋白。

二、专利摘要

本发明公开了一种利用家蚕生产蜘蛛丝蛋白的方法，包括如下步骤：1)在家蚕的丝素重链基因FibH上选择TALENs的两个靶点；2)分别构建用于表达TALENs的质粒；3)体外转录TALENs mRNA；4)构建包含蜘蛛丝基因MaSp1的donor载体；5)将TALENs mRNA和donor载体混合，对家蚕进行显微注射，注射后的蚕卵进行催青直到孵化，饲养出生产蜘蛛丝蛋白的家蚕个体。实验表明饲养孵化出来的G1代蚕卵中蜘蛛丝MaSp1基因替换了家蚕FibH基因，饲养的家蚕个体分泌出了蜘蛛丝，突破了传统转基因家蚕不能在家蚕丝腺中大量合成蜘蛛丝蛋白的限制。

三、专利状态

本技术已递交中国专利申请，申请号：201810562242.8，已获授权；持有人项目编号：SIPPE18-33。

四、持有单位

中国科学院分子植物科学卓越创新中心。

五、合作方式

转让、许可或合作研发。

六、联系方式

张雯，wzhang@cemps.ac.cn，021-54924138。