一、项目简介

本发明属于生物技术领域。本发明人经过广泛研究和反复试验，通过对基因突变位点的选择以及转基因质粒的构建将家蚕胚胎显微注射技术、荧光检测与分子生物操作相结合，构建了一个BmOsp基因突变家蚕品系，发现Osp基因突变后，雌雄突变体的正常交配行为均不受影响，雄性突变体作为亲本的蚕卵孵化率正常，然而雌性突变体作为亲本的蚕卵孵化率却接近0，可见BmOsp基因突变体家蚕雌性高度不育，可以用于鳞翅目昆虫的遗传控制，防治鳞翅目害虫，从而完成了本发明，在鳞翅目害虫通过雌性不育技术进行防治方面具有重要的价值。

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二、专利摘要

本发明公开了一种制备雌性不育的鳞翅目昆虫的方法及其核酸构建物。该方法包括：1)构建Osp基因敲除核酸构建物，其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件：U6启动子，第一Osp基因靶点和polyA；U6启动子，第二Osp基因靶点和polyA；2)将所述构建物和可表达Piggybac转座酶的PHA3PIG质粒共转鳞翅目新鲜昆虫卵，得G0代，自交得G1代；和，3)将所述G1代与表达Cas9蛋白的转基因鳞翅目昆虫交配得G2代，即得。本发明利用基于piggyBac转座子的CRISPR/Cas9技术成功构建了在不影响正常交配行为的前提下雌性不育的鳞翅目昆虫，在鳞翅目害虫通过雌性不育技术进行防治方面具有重要的价值。。

三、专利状态

本技术已递交中国专利申请，申请号：201910850906.5，实质审查中；持有人项目编号：SIPPE19-27。

四、持有单位

中国科学院分子植物科学卓越创新中心。

五、合作方式

转让、许可或合作研发。

六、联系方式

张雯，wzhang@cemps.ac.cn，021-54924138。