一种高效的酵母菌染色体融合方法

一、项目简介
本技术属于微生物合成生物学、基因组工程和分子生物学领域。本发明提供一种高效的酵母菌染色体融合方法。通过酵母原生质体转化技术,将含有着丝粒两侧同源序列和筛选标记的组件、参与融合的染色体两个近端粒区的同源序列和筛选标记的组件以及能在着丝粒两个同源序列间和近端粒区的两个同源序列处发生切割的sgRNA质粒一次转化到酵母细胞内。染色体在着丝粒和端粒附近被切割后,含有染色体上同源序列的着丝粒敲除组件和染色体融合组件通过酵母体内的同源重组整合到染色体上,通过sgRNA载体,Cas9载体和着丝粒组件、染色体融合组件上的标记筛选出需要的转化子。以往的染色体操作,往往受限于近端粒区有大段重复序列的染色体,而本发明人的方法可以实现任意染色体的融合;可以融合3条染色体为一条、4条染色体为两条;可以实现无痕融合,即染色体上不残留筛选标记;本发明的方法快速,简便,可应用于其他具有高效重组系统的真核生物,实施染色体工程改造。


二、专利摘要
本发明涉及一种高效的酵母菌染色体融合方法。本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统和酵母体内同源重组系统,进行酵母染色体融合的方法。本发明的方法可实现快速、高效的染色体融合。


三、专利状态
本技术已递交中国专利申请,申请号:201710729662.6,已获授权;持有人项目编号:SIPPE17-21。


四、持有单位
中国科学院分子植物科学卓越创新中心


五、合作方式
转让、许可或合作研发。


六、联系方式
任老师,021-54924289