一种细菌体内靶向蛋白酰基化修饰方法

一、项目简介

本发明属于分子生物学领域。为了探索基于CRISPR技术快速鉴定受乙酰化修饰调控的蛋白,发明人构思出酰基转移酶-dCas12a融合蛋白的表达方法。将四种有文献报道的乙酰化酶Pat、YfiQ、AcuA和At2进行了蛋白纯化,对目标蛋白Pta(磷酸转乙酰化酶)的乙酰化修饰来进行催化能力比较。通过衡量催化能力及蛋白大小,选定了永达尔梭菌来源的At2作为乙酰化修饰效应元件,靶向元件选择了土拉弗朗西斯菌Francisella tularensis来源的dCasl2a。因此本发明优化了一种基于CRISPR的细菌提内靶向蛋白酰基化修饰方法。

二、专利摘要

本发明公开了一种细菌体内靶向蛋白酰基化修饰方法,包括下述步骤:在CRISPR系统中,将酰基转移酶-dCas12a融合蛋白基因和crRNA基因构建在质粒上,并转入细菌内,通过细菌生长增殖,完成对靶向蛋白的酰基化修饰。本发明的方法拓宽了CRISPR技术的应用范围,实现了靶向蛋白的酰基化修饰。

三、专利状态

本技术已递交中国专利申请,申请号:202111383529.2,实质审查中;持有人项目编号:SIPPE21-40。

四、持有单位

中国科学院分子植物科学卓越创新中心。

五、合作方式

转让、许可或合作研发。

六、联系方式

张雯,wzhang@cemps.ac.cn,021-54924138。